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(附录一)补充附录


中国禽蛋门户网.中国 http://www.chinaegg.net     2004-9-22 17:47:22

在附录—中,加入了下面的第5节:

    第5节:世界卫生组织根据世界卫生组织有毒性等价因素(1997),确认了二氧(杂)芑PCDD/PCDF)为有毒性等价物。


┌───────┬──────────┬───────────┬───────────┐
│ 产品 │ 最高水平 │ 采样依据 │ 分析依据 │
├───────┼──────────┼───────────┼───────────┤
│5.1.1 源于的 │ │ │ │
│肉和肉制品(4) │ │ │ │
│ —反刍动·物 │3pgWHO-PCDD/F-TEQ/ │ │ │
│ (牛、羊) │ gfat(2)(3) │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│ │2pgWHO-PCDD/F-TEQ/ │ │ │
│ —禽类和养殖 │ gfat(2)(3) │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│ 的野鸟 │ │ │ │
│ │ │ │ │
│ —猪 │1pgWHO-PCDD/F-TEQ/ │ │ │
│ │ gfat(2)(3) │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│ │ │ │ │
│5.1.2 肝和肝 │ │ │ │
│ 制品 │6pgWHO-PCDD/F-TEQ/ │ │ │
│ │ gfat(2)(3) │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
├───────┼──────────┼───────────┼───────────┤
│5.2 鱼和水 │4pg WHO-PCDD/F-TEQ/g│Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│产(5)的瘦肉 │fresh │ │ │
│及相关产品 │weight(2) │ │ │
├───────┼──────────┼───────────┼───────────┤
│5.3 奶(6)和 │3pgWHO-PCDD/F-TEQ/g │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│奶制品,包 │fat(2)(3) │ │ │
│括黄油 │ │ │ │
├───────┼──────────┼───────────┼───────────┤
│5.4 鸡蛋和 │3pgWHO-PCDD/F-TEQ/g │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│蛋制品(7)(8) │fat(2) │ │ │
│ │ │ │ │
├───────┼──────────┼───────────┼───────────┤
│5.5油和油脂 │ │ │ │
│—动物脂肪 │ │ │ │
│一源于反刍 │ │ │ │
│ 动物 │3pgWHO-PCDD/F-TEQ/g │ │ │
│ │fat(2) │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│—源于禽类 │2pgWHO-PCDD/F-TEQ/g │ │ │
│ │fat(2) │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│ 和养殖野鸟 │ │ │ │
│—源于猪 │ │ │ │
│—混合动物油 │1pgWHO-PCDD/F-TEQ/g │ │ │
│ │fat(2) │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│—植物油 │2pgWHO-PCDD/F-TEQ/g │ │ │
│ │fat(2) │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│—用于人类消 │ │ │ │
│ 费的鱼油 │ │ │ │
│ │ │ │ │
│ │0.75pg │ │ │
│ │WHO-PCDD/F-TEQ/g │ │ │
│ │fat(2) │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│ │2pgWHO-PCDD/F-TEQ/g │ │ │
│ │fat(2) │Directive2001/…/EC(*)│Directive2001/…/EC(*)│
│ │ │ │ │
└───────┴──────────┴───────────┴───────────┘

    ——用于萃取的样本的重量必须能够是以能够正确计量。

    ——有许多可以使用的样本准备程序,要考虑哪一个程序要被使用。这个程序必须要确认为国际公认的程序。

4、对实验室的要求

    ——实验室应该能够证明一种检测各种范围的感兴趣的水平(如0.5倍、1倍和2位)的方法在重复分析时能得到一致的结果。可接收的依据的细节,请参照第5点。

    ——一种确认的检测方法的限值应该是能够检测到所感兴趣的值的约五分之一,要确保可接受的误差与可接受的感兴趣的水平相一致。

    ——常规的空白控制和尖峰经历或分析的控制样本(更可取的,如果属实,重新检测相关原料),应该当作内部质量控制措施实行。

    ——成功的参加联合实验室的研究,以接近熟练的实验室是最好的提高特殊分析能力的方法。虽然参加联合实验室的如油或污水样本的研究不会提高只含少量的污染物的食物或食品的研究能力,但是,继续参加联合实验室对相关饲料食物的二氧(杂)芑和二氧(杂)相似物二氯联苯的研究是必要的。

    ——根据93/99/EC号指令中的条款,实验室要由一个根据ISO 58号指示建立的实体授权,以确保他们提供的质量分析的可信性。实验室要依据ISO/IEC/17025:1999的标准被授权。

5、二氧(杂)芑和二氧(杂)芑相似物多氯联苯的分析程序的相应要求

    认可分析程序的基本要求:

    ——高度的敏感性和检验的高要求。对于PCDDs和PCDFs,其可检测值在微微克(10sub(-12)克)有毒等价物范围内,因为这是这种化合物有毒性的极限值。人们知道多氯联苯的存在率要比PCDDs和PCDFs高。大多数的多氯联苯同属物的敏感度在毫微克(10sub(-9)克)时已经足够了。尽管如此,对于更多的有毒性二氧(杂)芑相似物多氯联苯同属物(尤其是non-srtho替代物的同属物),其敏感度还是和PCDDs与PCDFs一样。

    ——高度的选择性(特异性)。我们需要一个特征以使PCDDs、PCDFs和二
氧(杂)芑相似物多氯联苯与大量的其它物质区分开,并有可能使用其它化合物而使其聚含到足够可以分析的浓度。气相色谱分析/质谱分析(GC/MS)的方法对于各种同属物的检测差异是必须的,比如在有毒性等价物(比如PCDDs的17种替代物同属和PCDFs和二氧(杂)芑相似物多氯联苯)和其它同属物之间。生物鉴定应该能够把PCDDs、PCDFs和二氧(杂)芑相似物多氯联苯区分开来。

    —一高度的精确性(真实性和准确度)。这应该是能够提供一个样本中的真实含量的确实有效估计。高度的精确性(测量结果与真实的或给定值之间的差别的精确性)可以避免有毒性等价物估值的不可靠分析结果的失败。精确性表现在真实性(用百分比表示的分析一种确定的原料或其确定原料的中间值的差异)和准确度(准确度通常是作为一个包括可重复性和可复制性的标准偏差,和指出在可预见情况下应用实验性程序所获得的结果之间的微小差异)。

    筛选方法可以由生物鉴定和气相色谱分析/质谱分析(GC/MS)的方法构
成,既定方法是高分辨率气相色谱分析/高分辨率质谱分析(URGC/HRMS)法。以下有毒性等价物总值准则必须强制实施:


┌───┬────┬─────┐
│ │筛选方法│既定方法 │
├───┼────┼─────┤
│失误率│<1% │ │
├───┼────┼─────┤
│真实率│ │-20%-20%│
├───┼────┼─────┤
│CV │<30,% │<15 │
└───┴────┴─────┘

6、遵从筛选或既定目的的GC/MS的特殊要求。

    ——必须在分析方法的最一开始就对PCDD/F标准内部(如果二氧(杂)芑相似物多氯联苯必须被确定,则也包括二氧(杂)芑相似物多氯联苯的内部标识)的2、3、7、8氯化替代物增加*C标识。比如,为了确认分析过程的提前淬取。需要加上至少一种每一种从四磷酸钠到八氯化物化合物的同属物(如果二氧(杂)芭相似物多氯联苯必须被确定,则也包括二氧(杂)芑相似物多氯联苯的至少一种同属物)(另外,至少有一种为每次用于监控PCDD/F和二氧(杂)芑相似物多氯联笨的质谱分析选定的离子记录功能的同属物)。有一种很清楚的参考,在既定方法中,使用17种PCDD/F标准内部的2、3、7、8替代物*C标识和所有12种二氧(杂)芑相似物多氯联苯标准内部的*C标识(如果多氯联苯
必须被确定的话)。

    对于那些没有用合适的标识方法加上*C相似物标识的那些同属物,要制
订相关的反应因素。

    ——对于植物源性食品和动物源性食品中脂肪含量少于10%的,其内部标准的增加是强制提前提取的。对于含有10%以上的脂肪的动物源性食品,其内部标准可以在提取前或提取后增加。在内部标准已经被介绍和其产品或基于脂肪的结果是否汇报的其础上,应该实行一种合适的被确定的提取效率。

    ——在GC/MS分析前,必须加上1个或2个复原(替代)标准。

    ——对于既定的方法对复原的控制是必要的,内部标准的复原应该在60%到120%的范围内。对于低于或高于复原同属物的,尤其是一些七和八氯化合物和氧芴,他们的有毒性等价物值超出有毒性等价物总值(只是基于PCDD/E)的10%是可以接受的。对于筛选方法,其复原应该在30%到140%的范围内。

    ——二氧(杂)芑从干涉化合物比如多氯联苯类和氯化联苯天空醚的分离应该由合适的色析法技术实施(最好是硅镁载体、氧化铝和/或碳类)。

    ——异构体的气相色谱分析要充分的分离(1,2,3,4,7,8-HxCDF和1,2,3,6,7,8-HxCDF峰值之间的差异<25)。

    ——鉴定要根据EPA方法的1613修订版B:四磷酸钠-所有八氯化合物二氧(杂)芑和呋喃类要用HRGC/HRMS同位素稀释法或另一种具有等价标准的方法。

    ——对于那些二氧(杂)芑污染大约在lpg WHO-TEQ/g脂肪(只是基于
PCDD/PCDF)的食品,它们的上限与下限之间的差异不能超出20%。对于含脂量较低的食品,将必须同样适用大约在lpgWHO-TEQ/g污染水平的产品的要求。对于较低的污染水平,比如说0.5pg WHO-TEQ/g的产品,其上限与下限之间的差异范围可以在25-40%的范围内。

7、筛选分析法

    7.1介绍

    可以在一种筛选法中使用不同的分析法:一种单纯的筛选法和一个计量法。

    筛选法:
一种单纯的筛选法和一个计量法。样本的反应是与感兴趣水平-的参照样本相比较的,样本的反应低于参照样本,则视为阴性,其反应高于参照样本的,则视为阳性。要求是:

    ——二在每次的检测系列中都必须有一个空白样本和一个参照样本,这要在周围环境完全相同的情况下在同一时间内淬取与检测。参照样本与空白样本比较时必须能显示出清晰的反应高度。

    ——0.5倍和2倍于感兴趣水平的特殊参照样本,应该被包括在证明在感兴趣水平控制的范围内的检验的合理性之内。

    ——当检测其它物质时,要确定参照样本的适用性,最好是由HRCC/HRMS提供的包含与参照样本或空白样本相似水平的有毒性等价物样本。

    ——由于生物的定量分析不能使用内部标准,重复多次试验对获得关于一次试验的标准偏差的信息是很重要的。变化系数应该小于30%。

    ——对于生物定量分析来说,应该解释目标化合物,可能的防碍和最大许可空白水平。

定量方法

    定量方法要求标准的稀释物(一份或三份)、量尺以及空白和恢复的控制,结果可能表示为TEQ,可以想像信号化合物符合TFQ原则。可以通过使用TCDD<或一种有毒化合物标准混合物)演示制出曲线图来测算萃取物和样本中的TEQ水平。结果对空白样品的TEQ水平和恢复值都是正确的。关键是注意,部分表面恢复损失可能是由于生物定量分析中的TEP值和世界卫生组织制定的空白TEP值之间的距陈效果制成差别。

    7.2用于筛选的分析方法的要求

    ——GC/MS分析法和生物鉴定法可以用于筛选。对于GC/MS法,使用的是第6点中规定的要求。细胞生物鉴定的特殊要求在7点第3项中,生物鉴定包酌要求在第7点第4项中。

    ——在把有毒性等价物与由既定分析方法确定的含量作比较时,大量的样本高于或低于最高水平或作用水平的失误阳性和失误阴性结果的材料是必要的。实际失误阴性率应该在1%以下。样本的阳性失误率应该较低到易于应用筛选方法。

    ——阳性结果总是要由既定方法(HRGC/HRMS)确认。而且,含多种有毒性等价物的样本应由HRGC/HRMS确认(约占阴性样本的2%到10%)。生物鉴定法与HRGC/HRMS的分析结果如果是一致的,则视为有效。

    7.3细胞生物鉴定的特殊要求

    ——当进行生物鉴定时,每一个进行的检测都要求有一系列的TCDD或二氧(杂)芑/呋喃(全部剂量函数为R2>0.95)浓缩参照物。但是,可以以筛选为目的而使用扩展低水平曲线来分析低水平样本。

    ——由于细胞的反应要依据许多因素,参照样本的相关反应与TCDD标准线比较时可能出现改变,所以应该给一个持续时间段内的生物鉴定结果使用一个质量控制表上的TCDD参考浓缩值(约3倍于限值量)。

    ——每一种参照物的质量控制曲线都应该记录下来并检查,以确保其结果依据了所定指示。

    ——尤其是量的计算,淡化样本的感应范围必须在反应曲线的范围之内。高于反应线的样本应该在淡化后重新检测。所以,建议一次至少要检测3份或更多的淡化样本。

    ——检测的限值可以是3倍于净溶济或背景反应的标准偏差。另一种方法是应用一种高于底线(感应5倍于净溶济因素)的那天的函数值计算。其量的限值可以是5倍到6倍于净溶剂或背景反应的标准偏差,或者应用一种高于底线(感应10倍于溶剂因素)的那天的函数值计算。

    7.4生物签订的特殊要求(1)

    ——必须遵守样本准备和样本分析的加工指示。

    ——检测包不应该在过了失效期后继续使用。

    ——不能使用指定用于其它检测包的物质或化含物。

    ——检测包应该在特定储存温度范围内存放和特殊操作温度范围内使用。

    ——基于10个复制的空白样本分析,并由直线衰退方程的倾斜值分离。免疫生物检测的限制确定为3倍于标准的偏差,应该在实验室中使用检测的参考标准,以确保对标准的度在可接受范围内。

8.结果的汇报

    由于目前使用的分析程序能够实现,为了在结果汇报的信息中包含一个最高值,分析结果中应该包括PCDD/F和多氯联苯各自的含量,并以其为下限、中限、上限汇报,并能够根据特殊要求阐明结果。

    报告还应该包括样本的脂类物质含量和所使用的脂质淬取方法。

    在第6点中提到的复原已经超出了范围,最高水平已经溢出和所要求的其它情况之下,各个复原的标准必须被确认。

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